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补肺益肾方源于河南中医药大学第一附属医院临床验方,由人参、黄芪、酒萸肉、醋五味子、炙淫羊藿、浙贝母和陈皮等12味药组成,是临床有效方剂,具有补肺益肾、益气化痰、止咳平喘等功效,可有效缓解慢性阻塞性肺炎(COPD)患者肺功能下降,减少急性加重发作次数和程度。前期研究发现,该复方的主要有效成分为皂苷类、单萜类、黄酮醇类成分,但由于其组成药物较多,目前对于该复方的有效物质基础研究尚不明确。因此,全面了解该复方的化学成分,对于后续的药效物质基础发现具有积极作用。
高分辨率串联质谱(如Orbitrap技术)与线性离子阱的结合,可提供丰富的具有高分辨率和快速扫描速度的MSn信息(全扫描时每次扫描≤1ms),且精度高(误差小于5?10-6),适用于各种化合物的结构解析。四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS)结合了UPLC的高效分离能力和MS的强大结构表征能力,从而提供了快速、灵敏、可靠和高通量的平台,可广泛获得化合物结构相关的碎片离子,已应用于中药复方的成分鉴定。
河南中医药大学呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心的李建生教授团队基于UPLC-Q-Orbitrap MS法,应用Mass Frontier质谱解析软件,定性分析了补肺益肾方的化学成分。采用Phenomenex kinetex C18(100mm?2.1mm,2.6μm)色谱柱,以1‰甲酸水-乙腈为流动相,0.2 mL?min-1流速梯度洗脱,柱温25℃,进样5 μL。应用Mass Frontier 6.0 工作站对采集到的碎片离子进行匹配,并结合文献报道,共鉴定了补肺益肾方的242个化学成分。在正离子模式下鉴定出205个化学成分,其中人参10个,黄芪17个,赤芍28个,浙贝母9个,炒紫苏子63个,陈皮9个,矮地茶8个,酒萸肉7个,醋五味子26个,炙淫羊藿28个;负离子模式下鉴定出37个成分,其中人参23个,黄芪14个。该方法可行性强,结果可信度高,可为补肺益肾方的药效物质研究提供基本数据。该研究获得国家自然科学基金(81603473,81803863)、河南省高校创新基金(18B360003)、河南省博士后基金(00104303)及河南中医药大学博士基金(03301189)资助。相关成果发表于《分析测试学报》2019年第1期1~13页。
doi:10.3969/j.issn.1004-4957.2019.01.001
【引用本文】黄海英,康俊丽,余亚辉,赵鹏,冯素香,杜燕,李建生. 基于UPLC-Q-Orbitrap MS法分析补肺益肾方化学成分[J].分析测试学报,2019,38(1):1-13.
【Cite this article】Huang Hai-ying, Kangjun-li, Yuya-hui, Zhaopeng, Fengsu-xiang,Duyan, Lijian-sheng.Identification of Chemical Constituents of Bufei Yishen Formula by UPLC-Q-Orbitrap MS[J].Journal of instrumental Analysis,2019,38(1):1-13.
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