寡糖是人乳的主要生物活性成分之一，具有抗病毒侵染、抗病原菌黏附、促进肠道有益菌群增殖、抗炎、免疫调节等作用，对婴儿健康成长发育非常重要。人乳寡糖由游离寡糖（HMOs）和结合型寡糖（HMGs）组成。由于分析方法和技术手段限制，现有研究多以人乳游离寡糖混合物为主，且结合型N/O-寡糖研究较少，限制了人乳寡糖结构与功能关系的研究。本研究在课题组前期发展的游离寡糖高效分离分析新方法、糖蛋白N/O-糖链释放及衍生化新方法和唾液酸化糖链异构体的“糖队列”分析策略基础上，运用生物质谱技术和多级串联液质联用技术分析了人乳游离寡糖、N/O-寡糖组的糖型结构和组成，定性定量比较了不同泌乳期人乳游离寡糖、N/O-寡糖组的差异，结果表明，新发现了14种双唾液酸修饰和3种三唾液酸修饰的酸性游离寡糖，3种单唾液酸修饰和4种双唾液酸修饰的N-糖链，随着泌乳期的延长，游离寡糖的种类和含量逐渐降低，结合型N/O-寡糖呈现先上升后下降的趋势。该研究为深入阐明人乳寡糖结构-功能关系、构建人乳寡糖数据库奠定了基础，为开发营养健康的婴幼儿配方食品提供理论依据。