液相色谱-串联质谱法测水果和蔬菜中氟虫腈残留量的方法验证

液相色谱-串联质谱法测水果和蔬菜中氟虫腈残留量的方法验证

1 范围
本标准规定了苹果、橙子、洋白菜、芹菜、西红柿中450种农药及相关化学品残留量液相色谱-串联质谱的测定方法。
本标准适用于苹果、橙子、洋白菜、芹菜、西红柿中450种农药及相关化学品残留量液相色谱-串联质谱的测定。
2 规范性文件
  本方法依据GB/T 20769-2008《水果和蔬菜找那个450中农药及相关化学品残留量的测定  液相色谱-串联质谱法》。
3 原理
  试样用乙腈匀浆提取，盐析离心，氨基固相萃取柱净化，用乙腈+甲苯（3+1）洗脱农药及相关化学品，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明，本方法所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1试剂及其配制
4.1.1乙腈：色谱纯
4.1.2正己烷：色谱纯
4.1.3异辛烷：色谱纯
4.1.4甲苯：优级纯
4.1.5丙酮：色谱纯
4.1.6二氯甲烷:色谱纯
4.1.7 甲醇：色谱纯
4.1.8有机微孔过滤膜：0.22μm
4.1.9氨基固相萃取小柱：1g,6mL
4.1.10乙腈+甲苯（3+1，体积比）
4.1.11乙腈+水（3+2，体积比）
4.1.12 0.05%甲酸溶液（体积比）
4.1.135mmol/L乙酸铵溶液：称取0.375g乙酸铵加水稀释至1000mL
4.1.14无水硫酸钠：分析纯，用前再650℃灼烧4h,贮存在干燥器中，冷却备用。
4.1.15氯化钠：优级纯
4.1.16氟虫腈标准品:纯度≥95%
4.1.17烯酰吗啉标准品：纯度≥95%
4.1.17.1标准储备溶液的配制：分别称取10mg（精确至0.1mg）标品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，储备液浓度为：1.0mg/mL。
4.1.17.2标准工作液的配制：分别吸取氟虫腈和烯酰吗啉的标准储备液各 0.01mL、0.02mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL于10mL容量瓶中，加甲醇稀释定容至刻度，工作液浓度为： 1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL                                                   
5  仪器和设备和材料
5.1液相色谱-串联四级杆质谱仪：配有电喷雾电离源（ESI）
5.2分析天平：感量0.1mg和0.1g
5.3高速组织捣碎机：转速不低于20000r/min
5.4 离心管：80mL
5.5 离心机：最大转速为4200r/min
5.6旋转蒸发仪
5.7鸡心瓶:200mL
5.8移液管：1.0mL
5.9样品瓶：2mL
5.10氮气吹干仪
6  试样处理
6.1试样的制备
6.1.1提取：
6.1.1.1称取20g(精确到0.01g)试样匀浆，置于80mL离心管中，加入40mL乙腈，用高速组织捣碎机再15000r/min,匀浆提取1min,加入5g氯化钠，再匀浆提取1min,在3800r/min离心5min,取上清液20mL，在40℃水浴中旋转浓缩至1mL，待净化。
6.1.1.2净化：在氨基固相萃取柱中加入约2cm无水硫酸钠，并放入下接鸡心瓶的固定加上，加样前先用4mL乙腈+甲苯（3+1）预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液转移至净化柱上，并更换鸡心瓶接收，再次用2mL乙腈+甲苯（3+1）洗涤样液瓶三次，并将洗涤液移入柱中，在柱上加上50mL贮液器，用25mL乙腈+甲苯（3+1）洗脱农药，合并鸡心瓶中，并在40℃水浴上旋转浓缩至约0.5mL,将浓缩液置于氮气吹干，迅速加入1mL的乙腈+水（3+2），混匀，经0.2μm滤膜过滤，进行液相色谱-串联质谱测定。
7  测定条件
7.1 仪器条件：
7.1.1色谱柱：C18柱，柱长150mm，内径2.1mm，粒径1.7μm。
7.1.2流动相：A相（乙腈%）  B相：5mmol/L乙酸铵（含0.02%甲酸）

时间	A：乙腈	B：5mmol/L乙酸铵（含0.02%甲酸）
0	10	90
2	10	90
3	90	10
7	90	10
9	10	90
11	10	90

7.1.3流速：0.3mL/min。
7.1.4进样体积：1.0μL
7.1.5柱温：30℃。
7.2质谱条件：
7.2.1离子源：ESI；
7.2.2扫描方式：氟虫腈：负离子扫描；
7.2.3检测方式：多反应监测；
7.2.4 DL温度：250℃；
7.2.5加热块温度：400℃；
7.2.6干燥气的流量：15L/min；          7.2.7雾化气流量：3L/min。

项目名称	电离模式	监测离子对	碰撞电压V
氟虫腈	ESI-	436.7/332.05	16.0
		436.7/330.0	16.0

X(μg/kg)=	c×V×1000×f
	m×10000

8 结果处理


式中：X—样品的各组分的含量，μg/kg；
      C —试样被测液中各组分的测定浓度，ng/mL；
V —试样定容体积，mL；
1）.线性结果
将标准系列工作溶液分别注入液相色谱-串联质谱仪中， 测定相应的峰面积，以标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
Y=3448.89*X+2974.83R^2=0.9992176

以上结果表明氟虫腈在1.0~10.0 ng/mL范围内，R^{^2}= 0.9992176 ，氟虫腈浓度和峰面积呈线性关系，线性良好，符合要求。
2）.检测限结果
将1.0μg/mL标准溶液逐级稀释至S/N=3.03，得出氟虫腈的方法检出限为0.080μg/kg，符合规定要求。

3）.方法精密度（重复性）结果
    取氟虫腈阴性样品进行加标的试样连续进样6次，进样体积为1.0μL。

项目	1	2	3	4	5	6
含量（μg/kg）	0.152	0.152	0.151	0.152	0.152	0.154
平均值（μg/kg）	0.152
RSD%	0.693

本方法的精密度为0.693%，符合样品的精密度要求。因此，本次测定均符合要求。

4）.准确度验证（加标回收）
与样品同步处理，对样品加标，取20.0ng/mL的标液0.15mL、0.80mL、1.00mL同样品同步处理后，结果见下表：

序号	m （g）	V （mL）	C （ng/mL）	稀释倍数	含量 （μg/kg）	加标量 （μg/kg）	回收率 %
1#	20.0089	1.0	ND	2.0	ND	/	/
2#	20.0010	1.0	ND	2.0	ND	/	/
加标1	20.0323	1.0	1.249	2.0	0.125	0.150	83.3
加标2	20.0402	1.0	6.753	2.0	0.674	0.800	84.2
加标3	20.0721	1.0	8.534	2.0	0.850	1.00	85.0

由上表可以看出金刚烷胺测定的加标回收范围在 80%-110% ，RSD值为0.01%
符合规定。

9.总结
从检出限、线性范围、重复性、回收率测试结果可知，均符合方法要求，本方法可行。

维权声明：本文为T130554原创作品，本作者与（仪器信息网/我要测网）是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。