雌激素具有广泛而重要的生理作用，然而，当雌激素通过饮用水和食物在人体内积累超过安全阈值时，会损害人类健康、破坏机体平衡，甚至危害后代。目前，雌激素的检测方法主要有色谱法、电化学法、表面增强拉曼光谱（SERS）法等。色谱法灵敏度高、稳定性好，但无法应用于现场检测；电化学法和SERS法响应快速、灵敏，均可用于现场检测，但稳定性和重现性较低。试纸条是一种纸基快速检测技术，低成本、易操作、可实现现场检测，目前已广泛应用于临床诊断、食品安全、环境监测等领域。胶体金因其显色结果肉眼可见而常用作试纸条显色探针，但其灵敏度较低且读数结果具有主观性。为提高试纸灵敏度，可以采用金纳米花/金纳米棒或对胶体金二次标记，或开发荧光型侧流分析试纸，如以小分子有机染料、量子点、上转换纳米粒子等为信号探针，但上述荧光型侧流分析试纸存在试纸荧光背景干扰或需要高能量激光光源等弊端。我们根据目前技术不足及检测需要，基于免疫识别和荧光共振能量转移原理，以偶联雌激素-牛血清蛋白的长余辉粒子为荧光供体，以雌激素单克隆抗体修饰的胶体金为荧光受体，建立了雌激素的竞争型时间分辨荧光、显色双信号试纸条。本方法以低功率紫外灯为激发光源，以智能手机连拍功能实现TRF模式采集试纸的检测区荧光图像，有效去除试纸荧光背景干扰进而提高信噪比；以余辉优良的大尺寸长余辉粒子为荧光信号源并利用其在硝酸纤维素膜上不迁移的特性将雌激素竞争物固定于检测区，巧妙解决了常规试纸对信号材料尺寸的纳米级别限制和小尺寸长余辉粒子余辉短暂的矛盾；时间分辨荧光和显色双信号检测将裸眼快筛与精密定量相结合，同时提高了结果的可信度，是一种高效、可靠的雌激素快检方法。